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Fille de José Antonio Mestre et Maria Teresa Batista-Falla de Mestre, Mademoiselle Maria Teresa Mestre est née le 22 mars 1956 à la Havane, Cuba.
 En octobre 1959, au moment de la révolution, Elle quitta Cuba avec Ses parents. La famille s’établit d’abord à New York. La jeune Maria Teresa devint élève du Lycée de Marymount. À partir de 1961, Elle étudia à l’École Française de New York.
En juin 1965, Ses parents s'installèrent pendant quelques mois dans la propriété familiale à Santander en Espagne, puis établirent leur domicile définitif à Genève. La jeune fille continua Ses études à l'Institut Marie-José à Gstaad, puis au pensionnat Marie-Thérèse à Genève, où Elle passa avec succès le baccalauréat français en juin 1975. Lors de Son séjour en Suisse, Son Altesse Royale obtint la nationalité helvétique. Elle s’inscrivit à l’Université de Genève qui Lui décerna en 1980 la licence ès Sciences Politiques.
Elle a rencontré son futur époux, le Prince Henri de Luxembourg durant leurs études universitaires. Ils ont poursuivi pendant quatre ans les mêmes études, en travaillant ensemble dans un certain nombre de cercles d'études. Elle a ainsi présenté plusieurs mémoires dont une étude comparative des législations dans la CEE sur le travail des femmes et la maternité.
En même temps, Son Altesse Royale s'est intéressée aux problèmes sociaux et humanitaires, reprenant ainsi une tradition familiale qui avait amené Ses grands-parents à prendre une part active dans les œuvres philanthropiques et culturelles de Cuba.
Parallèlement à Ses études, Son Altesse Royale a fait partie à Genève d'un groupe qui s'occupait de personnes âgées vivant dans des maisons de retraite. Elle a également donné des leçons dans une classe d'enfants genevois.
En plus de l'espagnol, qui est Sa langue maternelle, la Grande-Duchesse parle couramment le français et l’anglais. Elle parle également le luxembourgeois et a de bonnes connaissances d'allemand et d'italien.
Pendant Son enfance, Son Altesse Royale a pris des cours de ballet et de chant. Elle joue de la guitare. Elle aime la musique et la littérature et S'intéresse à la peinture. Sportive, Elle pratique le ski, le patinage et les sports nautiques. Elle a une sœur et un frère qui habitent en Suisse et un frère ainé qui a élu domicile aux États-Unis.
 Le 14 février 1981, Mademoiselle Maria Teresa Mestre a épousé à Luxembourg Son Altesse Royale le Prince Henri, Grand-Duc Héritier.
Leurs Altesses Royales ont 4 fils et une fille:
- le Prince Guillaume, né le 11 novembre 1981
- le Prince Félix, né le 3 juin 1984
- le Prince Louis, né le 3 août 1986
- la Princesse Alexandra, née le 16 février 1991
- le Prince Sébastien, né le 16 avril 1992
Depuis le 10 juin 1997, Son Altesse Royale la Grande-Duchesse est Ambassadeur de Bonne Volonté de l’UNESCO pour l’éducation des femmes et des filles partout dans le monde et pour la promotion des microcrédits. Elle préside de nombreuses fondations humanitaires qui agissent dans ce sens. Elle soutient avec force toutes les actions qui donnent aux femmes les moyens d'être autonomes et de défendre leurs droits. Ainsi, la Grande-Duchesse appuie tous les projets portant sur l’amélioration de la qualité de vie des filles, des femmes et de leurs familles grâce à la mise en œuvre de programmes d’éducation et l’octroi de microcrédits.
La Grande-Duchesse a visité de nombreux projets au Népal, au Mali, au Bangladesh, en Thaïlande, au Laos et en Bosnie, et elle a dénoncé la condition réservée aux femmes en Afghanistan. La Grande-Duchesse défend tout particulièrement la cause des enfants, et à ce titre soutient notamment les programmes d’aide aux enfants de la rue et aux orphelins du Sida, la lutte contre la prostitution infantile et la pédophilie sur Internet.
Le 7 octobre 2000, Son époux, le Grand-Duc Héritier, a accédé au trône et porte désormais le titre de Grand-Duc de Luxembourg; Son Altesse Royale porte depuis cette date le titre de Grande-Duchesse de Luxembourg.
La Grande-Duchesse est Présidente d’Honneur de la Fondation du Grand-Duc Henri et de la Grande-Duchesse Maria Teresa. Cette Fondation, créée en juin 2004 par la fusion de la Fondation Prince Henri – Princesse Maria Teresa et de la Fondation du Grand-Duc et de la Grande-Duchesse a pour objectif d’aider les personnes dans le besoin au Luxembourg, les personnes souffrant d’un handicap, physique, psychique ou mental, les enfants en difficultés d’apprentissage ainsi que de soutenir des projets d’aide au développement.
La Grande-Duchesse est en outre Présidente de la Croix-Rouge Luxembourgeoise, Présidente de la Fondation luxembourgeoise contre le Cancer, Présidente d’Honneur de la Fondation Recherche sur le SIDA et la Ligue Luxembourgeoise de Prévention et d’Action médico-sociales est placée sous son haut patronage. Elle est également Haute Protectrice notamment de l’association SOS Villages d’Enfants Monde, membre d’honneur de l’ "International Paralympic Committee Honorary Board" ainsi que membre actif de la Fondation Mentor créée sous le patronage de l’Organisation mondiale de la santé et dont le but est de prévenir la consommation de drogues par les jeunes.
Son Altesse Royale a été nommée Docteur Honoris Causa de la Seton Hall University (New Jersey, U.S.A., octobre 1999) et de l’Université de León (Nicaragua, février 2003).
Le 13 juin 2006, elle s’est vue décerner le "Path to Peace Award 2006" à New York. Attribué auparavant à des personnalités comme Lech Walesa, Kofi Annan ou le Roi Baudouin, ce prix est attribué chaque année à un personnage de la vie publique qui s’est distingué par son engagement humanitaire et social.
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